【精品干货】简单适用，用origin快速拟合荧光寿命！

审核：小铅笔

荧光寿命的测试，测试的结果是光源激发下所监测的发射波长的荧光衰减曲线，一般工程师会给相应的寿命拟合结果：拟合的曲线、拟合的加权残差（文本数据）、拟合的寿命 τ1 (τ2、τ3)和对应的占比 B1 (B2、B3)（如附图1），平均寿命可通过公式（附图2）计算获得。

附图1

附图2

上述平均寿命 τ 的两种表达式本质上是相同的，

因为Rel%本身

就是 τ₁ (τ₂、τ₃)和B₁ (B₂、B₃)的函数，

实际应用中第二个式子更为简化、计算更方便。

附图1中 χ2 表示置信因子，当0.8<χ2 <1.3时，表示拟合结果可靠适用。工程师一般用爱丁堡仪器自带的软件给出相应合适阶数的拟合，该拟合结果仅供参考。结合自身样品，如需其它阶数的结果，可用origin快速拟合。

origin快速拟合的步骤如下

荧光衰减曲线通常选用指数函数（exponential）拟合，对应在Origin里的ExpDec（指数衰减）或者ExpDecay（带 x₀ 偏移量的指数衰减）。有不同指数的衰减函数可选，不同的指数即对应不同的拟合阶数。

方法一：用ExpDec函数

原始数据（衰减曲线）作图后如(附图3)所示，y 轴最高点数据对应的 x 轴的9.57处，为使 y 轴最高点数据对应 x=0处，将 x 轴数据统一减去9.57。

操作方法如下：新增一列 x 轴和一列 y 轴数据，设置 x 轴数值=原 x 轴数值- 9.57，对应的 y 轴数值不变；将 x=0之前的数据删掉，作图得到(附图4)。

附图3

附图4

开始拟合寿命，依次选择 Fitting -Exponential Fit – Open Dialog（附图5），选择对应的阶数，这边是用 ExpDec2，即二阶拟合（附图6）。 

附图5

附图6

点击 Fit，即得到拟合结果，寿命 τ₁、τ₂和系数 A₁、A₂（附图7）。A等同于前文中的B。拟合出的 Adj.R-Square 表示数据和拟合曲线的相关性，该数值越接近1表示拟合结果越可靠。

附图7

方法二：用ExpDecay函数

原始数据（衰减曲线）作图后如上文的（附图3)，观察得知 y 轴最高点数据对应的 x 轴的9.57处。直接用带 x₀ 偏移量的 ExpDecay 函数拟合，依次选择 Fitting - Exponential Fit – Open Dialog，选择对应的阶数，这边是用 ExpDecay2（附图8）。

附图8

再选择 Date Selection – Select Range from Graph（附图9），在图中选择对应要拟合的范围，一般是从 y 轴最高点到 y 轴曲线几乎水平的位置（附图10）。如曲线接近水平的位置难以判断，可纵坐标取对数来判断。

附图9

附图10

选择好拟合的曲线范围后双击关闭，再选择Parameters将 x₀ 的数值固定成9.57（附图11），点击 Fit，得到拟合结果（附图12）。

附图11

附图12

可以看到，用 ExpDec和 ExpDecay函数拟合出的结果是几乎一致的（理论上精确选好条件后就是一致的），只是 τ₁、τ₂和 A₁、A₂调了个顺序。两种拟合方法都是适用的，喜欢用哪个就用哪种方法，前提是一定要结合经验和材料本身判断好合适的拟合阶数。

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